*(VE)酶聯免疫說明書
目的:本試劑盒用于測定奶粉及相關樣本中*(VE)的含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中維生素E(VE)水平。用純化的維生素E(VE)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入維生素E,再與HRP標記的維生素E(VE)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的維生素E(VE)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中維生素E(VE)濃度。
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試劑盒組成
說明書
封板膜
密封袋
酶標包被板
標準品:90umol/L
標準品稀釋液
酶標試劑
樣品稀釋液
顯色劑A液
顯色劑B液
終止液
濃縮洗滌液
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樣本處理及要求:
1. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
3. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
4. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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Elisa試劑盒規格,96T/48T
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