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動物實驗基本操作之“麻醉方法”

時間:2014-3-11閱讀:1532
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  麻醉(anesthesia)的基本任務是消除實驗過程中所至的疼痛和不適感覺,保障實驗動物的安全,使動物在實驗中服從操作,確保實驗順利進行。
  
  一、常用的麻醉劑
  
  (一)動物實驗中常用的麻醉劑分為三類,即揮發性麻醉劑、非揮發性麻醉劑和中藥麻醉劑。
  
  1、揮發性麻醉劑
  
  包括乙。mi、氯仿等,乙mi吸入麻醉適用于各種動物,其麻醉量和致死量差距大,所以安全度亦大,動物麻醉深度容易掌握,而且麻后蘇醒較快。其缺點是對局部刺激作用大,可引起上呼吸道粘膜液體分泌增多,再通過神經反射可影響呼吸、血壓和心跳活動,并且容易引起窒息,故在乙mi吸入麻醉時必需有人照看,以防麻醉過深而出現以上情況。
  
  2、非揮發性麻醉劑
  
  這類麻醉劑種類較多,包括苯*鈉、戊*鈉、硫噴妥鈉等*類的衍生物,氨基甲酸乙脂和*。這些麻醉劑使用方便,一次給藥可維持較長的麻醉時間,麻醉過程較平衡,動物無明顯掙扎現象。但缺點是蘇醒較慢。
  
  3、中藥麻醉劑
  
  動物實驗時有時也用到象洋金花和*等中藥麻醉劑,但由于其作用不夠穩定,而且常需加佐劑麻醉效果才能理想,故在使用過程中不能得到普及,因而,多數實驗室不選用這類麻醉劑進行麻醉。
  
  (二)幾種常用的麻醉藥及其用法
  
  1、氨基甲酸乙酯(烏拉坦)
  
  常用于兔、狗、貓、蛙類等動物。本藥易溶于水,常配成20%或25%的注射液,注射時可先快后慢,一次給藥可維持4~5h,麻醉過程較平穩,動物無明顯掙扎現象,但動物蘇醒慢,麻醉深度和使用劑量較難掌握。
  
  2、*類
  
  用于動物實驗的主要有三種:戊*鈉,苯*鈉,硫噴妥鈉。其中zui常用的是戊*鈉,常配成3%~5%的注射液。此藥作用發生快,持續時間3~5h。配制方法:戊*鈉3~5g加入95%乙醇溶液l0ml,加溫助溶(不可煮沸)后,再加入0.9%氯化鈉溶液至l00ml。靜脈注射時,前1/3劑量可推注,后2/3劑量則應緩慢注射,并密切觀察動物的肌緊張狀態,呼吸變化及角膜反射。動物麻醉后常因麻醉藥的作用以及肌肉松弛和皮膚血管擴張而致使體溫緩慢下降,所以應設法保溫,不使肛溫降至37℃以下。
  
  3、氯醛糖
  
  此藥溶解度小,常配成1%水溶液,使用前需在50℃水浴鍋中加熱使其全部溶解,但不宜直接加熱,更不能煮沸,以免影響藥效。加溫后不宜久置,以免沉淀而失效。配制時若加入適量硼砂,可提高其溶解度和穩定性。一般取氯醛糖1g,硼砂2g,加水至100ml。
  
  4、普魯卡因
  
  局部注射麻醉藥。手術前,常用1%或2%水溶液注入手術部位皮下或肌肉,阻斷神經纖維的傳導,提高感受器官的感覺閾值,因而能夠耐受手術操作。
  
  5、乙mi
  
  吸入性麻醉藥,可用于各種動物,尤其是時間短的手術或實驗,吸入后20~30s開始發揮作用。其特點是,麻醉深度易掌握,較安全,麻醉后蘇醒快,但麻醉時有明顯的興奮現象,且對呼吸道黏膜有較強的刺激分泌作用,使黏液分泌增加,易阻塞呼吸道而發生窒息。乙mi為無色,易揮發,有刺激性氣味的液體,易燃燒和爆炸,在光和空氣作用下,可生成乙醛或過氧化物而具有較大毒性,因此,開瓶后不能久置。
  
  二、動物的麻醉方法
  
  1、全身麻醉
  
  (1)吸入法
  
  用一塊圓玻璃板和一個鐘罩或一個密閉的玻璃箱作為揮發性麻醉劑的容器,多選用乙mi作麻藥。麻醉時用幾個棉球,將乙mi倒入其中,迅速轉入鐘罩或箱內,讓其揮發,然后把待麻醉動物投入,約隔4~6分鐘即可麻醉,麻醉后應立即取出,并準備一個蘸有乙mi的棉球小燒杯,在動物麻醚變淺時給套在鼻上使其補吸麻藥。本法zui適于大、小鼠的短期操作性實驗的麻醉,也可用于較大的動物。
  
  由于乙mi燃點很低,遇火極易燃燒,所以在使用時,一定要遠離火源。
  
  (2)腹腔和靜脈給藥麻醉法
  
  非揮發性和中藥麻醉劑均可用作腹腔和靜脈注射麻醉,操作簡便,是實驗室zui常采用的方法之一。腹腔給藥麻醉多用于大小鼠和豚鼠,較大的動物如兔、狗等則多用靜脈給藥進行麻醉。由于各麻醉劑的作用長短以及毒性的差別。所以在腹腔和靜脈麻醉時,一定要控制藥物的濃度和注射量。
  
  2、局部麻醉
  
  ⑴貓的局部麻醉一般應用0.5~1.0%*注射。粘膜表面麻醉宜用2%鹽酸可ka因。
  
  ⑵兔在眼球手術時,可于結膜囊滴入0.02%鹽酸可ka因溶液,數秒鐘即可出現麻醉。
  
  ⑶狗的局部麻醉用0.5~1%*注射。眼鼻、咽喉表面麻醉可用2%鹽酸可ka因。
  
  3、麻醉效果的觀察
  
  動物的麻醉效果直接影響實驗的進行和實驗結果。如果麻醉過淺,動物會因疼痛而掙扎,甚至出現興奮狀態,呼吸心跳不規則,影響觀察。麻醉過深,可使機體的反應性降低,甚至消失,更為嚴重的是抑制延髓的心血管活動中樞和呼吸中樞,使呼吸、心跳停止,導致動物死亡。因此,在麻醉過程中必須善于判斷麻醉程度,觀察麻醉效果。
  
  判斷麻醉程度的指標有:
  
  ①呼吸:加快或不規則,則麻醉過淺,可再追加麻醉,若呼吸由不規則轉變為規則且平穩,說明已達到麻醉深度。若動物呼吸變慢,且以腹式呼吸為主,說明麻醉過深,動物有生命危險。
  
  ②反射活動:角膜反射靈敏,則麻醉過淺;反射遲鈍,麻醉程度適宜;反射消失,伴瞳孔散大,則麻醉過深。
  
  ③肌張力:亢進,麻醉過淺;全身肌肉松弛,麻醉合適。
  
  ④皮膚夾捏反應:麻醉過程中可隨時用*或有齒鑷夾捏動物皮膚,若反應靈敏,則麻醉過淺;若反應消失,則麻醉程度合適。
  
  三、使用麻醉劑的注意事項
  
  (一)注意動物個體差異不同的動物個體對麻醉劑的耐受性不同。在使用麻醉劑時,必須密切注意觀察動物的狀態,以決定麻醉藥用量。麻醉的深淺,可根據呼吸的深度和頻率、角膜反射的敏感度、四肢和腹壁肌肉的緊張性以及皮膚夾捏反應等指標進行判斷。當上述指標明顯減弱或消失時,應立即停止給藥。
  
  另外,麻醉劑量往往與動物的種類、健康狀況有關。如灰兔比大白兔抵抗力要強;妊娠兔對麻醉藥的耐受量較小,如按常規劑量麻醉往往會過量,使用時應酌減原劑量。
  
  (二)注意給藥速度在采用靜脈注射麻醉藥時,注射速度應緩慢;或者藥量的前一半快速注入,使其迅速渡過興奮期,后一半藥緩慢注入。如果沒有把握,不要給全量,麻醉稍淺可追加藥量,否則注射過速,用藥過量,易導致動物死亡。
  
  靜脈注射必須緩慢,同時觀察肌肉緊張性、角膜反射和對皮膚夾捏的反應,當這些活動明顯減弱或消失時,立即停止注射。配制的藥液濃度要適中,不可過高,以兔麻醉過急;但也不能過低,以減少注入溶液的體積。
  
  (三)注意麻醉劑的新鮮度麻醉劑配制時間過久,發生絮狀混濁及冷天有結晶沉淀,均不宜使用。后者經加熱,結晶溶解還可使用。
  
  (四)注意補加麻醉劑的方法當麻醉深度不夠,動物出現掙扎、呼吸急促等反應,可臨時適當補加麻醉劑,一般每次補加劑量不宜超過注射總量的1/10~1/5。
  
  (五)注意體重與麻醉劑量的關系麻醉前一定要先稱動物體重,然后嚴格按照參考劑量給藥。
  
  (六)注意麻醉過量的處理當麻醉過量時,動物呼吸慢而不規則,甚至呼吸停止,血壓下降,心跳微弱或停止。此時應立即進行搶救,如進行人工呼吸和心臟按摩,必要時用蘇醒劑。
  
  (七)麻醉時需注意保溫。麻醉期間,動物的體溫調節機能往往受到抑制,出現體溫下降,可影響實驗的準確性。此時常需采取保溫措施。保溫的方法有,實驗桌內裝燈,電褥,臺燈照射等。無論用哪種方法加溫都應根據動物的肛門體溫而定。
  
  常用實驗動物正常體溫
  
  貓為38.6℃±1.0℃
  
  兔為38.4℃±1.0℃
  
  大鼠為39.3℃±0.5℃。
  
  (八)作慢性實驗時,在寒冷冬季,麻醉劑在注射前應加熱至動物體溫水平。
  
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