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P21 蛋白(P21)酶聯(lián)免疫分析,Elisa試劑盒 廣銳生物-國內(nèi)高、優(yōu)Elisa試劑盒供應(yīng)商
目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中P21 蛋白(P21)的含量。
實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人P21 蛋白(P21)水平。用純化的人P21 蛋白
(P21)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入P21 蛋白(P21),再與
HRP 標(biāo)記的P21 蛋白(P21)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加
底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。
顏色的深淺和樣品中的P21 蛋白(P21)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD
值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人P21 蛋白(P21)濃度。
P21 蛋白(P21)酶聯(lián)免疫分析,Elisa試劑盒
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10 孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)
準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二
孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,
混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉,再各取50μl 分別加到第五、第六孔
中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各
取50μl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混
勻后從第七、第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)
品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl 棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,
濃度分別為36ng/L,24ng/L ,12ng/L,6ng/L, 3ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣
品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣
品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混
勻。
P21 蛋白(P21)酶聯(lián)免疫分析,Elisa試劑盒
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