雞 (Chicken) 白細胞介素-6 (IL-6) ELISA 檢測試劑盒

本試劑僅供研究使用    

試驗原理：

IL-6試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知IL-6濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將IL-6和*標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-6的濃度呈比例關系。

試劑盒內容及其配制

試劑盒成份（2-8℃保存）

96孔配置

48孔配置

配制

96/48人份酶標板

1塊板（96T）

半塊板（48T）

即用型

塑料膜板蓋

1塊

半塊

即用型

標準品：800pg/ml

1瓶（0.6ml）

1瓶（0.3ml）

按說明書進行稀稀

空白對照

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

即用型

標準品稀釋緩沖液

1瓶（4.0ml）

1瓶（2.0ml）

即用型

*標記的抗IL-6抗體

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

親和鏈酶素-HRP

1瓶（8.0ml）

1瓶（4.0ml）

即用型

洗滌緩沖液

1瓶（20ml）

1瓶（10ml）

按說明書進行稀釋

底物A

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

底物B

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

終止液

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

標本稀釋液

1瓶（12ml）

1瓶（6.0ml）

即用型

自備材料

蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項

試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法

血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備

標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：

800 pg/ml

（6號標準品）

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。

400 pg/ml

（5號標準品）

100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液

200 pg/ml

（4號標準品）

100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液

100 pg/ml

（3號標準品）

100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液

50 pg/ml

（2號標準品）

100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液

25 pg/ml

（1號標準品）

100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液

0 pg/ml

（空白對照）

原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實驗方案

標準品濃度（pg/ml）

A

800

800

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

B

400

400

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

C

200

200

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

D

100

100

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

E

50

50

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

F

25

25

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

G

0

0

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

H

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

局限

6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細胞因子反應。

3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

結 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的IL-6標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的IL-6含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍：0-800pg/ml

4、敏感度： 1.0 pg/ml

人免疫抑制酸性蛋白(IAP)ELISA試劑盒
人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)ELISA試劑盒
人發動蛋白2(DNM2)ELISA試劑盒
人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA試劑盒
人巨噬細胞刺激蛋白(MSP)ELISA試劑盒
人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA試劑盒 
人核基質蛋白22(NMP-22)ELISA試劑盒
人軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA試劑盒
人多藥耐藥相關蛋白(MRP)ELISA試劑盒
人高速泳動蛋白17(HMG-17)ELISA試劑盒 
人空泡毒素相關蛋白A(VacA)ELISA試劑盒
人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA試劑盒
人波形蛋白(VIM)ELISA試劑盒
人表面活性蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒
人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA試劑盒
人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒
人β連環蛋白/聯蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒
人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA試劑盒
人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA試劑盒
人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒
人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*(AcSDKP)ELISA試劑盒
人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒
人腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒
人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒
人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒
人髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒
人結蛋白(Des)ELISA試劑盒
人S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒
人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒
人巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒
人凝膠原蛋白(gelson)ELISA試劑盒
人踝蛋白(talin)ELISA試劑盒
人角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA試劑盒
人β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒
小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1) ELISA試劑盒
小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒
小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒
小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 
小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒
小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒
小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒
小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒
小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
小鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒
小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒
小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒
小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒
小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒
小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒
小鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒
小鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒
小鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒
鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)單抗
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒 
小鼠垂體腺苷酸環化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒 
小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒 
小鼠磷脂酰*(PS)ELISA試劑盒 
小鼠*磷酸酯(PC/CPG)ELISA試劑盒 
小鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒 
小鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒 
小鼠神經絲蛋白(NF)ELISA試劑盒 
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)ELISA試劑盒 
小鼠*/*蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒 
小鼠IgG ELISA試劑盒
小鼠IgM ELISA試劑盒
小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒 
小鼠抗紅細胞抗體(RBC)ELISA試劑盒 
小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒 
小鼠CD19分子(CD19)ELISA試劑盒 
小鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒 
小鼠小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)ELISA試劑盒 
小鼠小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)ELISA試劑盒 
小鼠小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)ELISA試劑盒 
小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 
小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試劑盒 
小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 
小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒 
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒 
小鼠垂體腺苷酸環化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒 
小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒 
小鼠磷脂酰*(PS)ELISA試劑盒 
小鼠*磷酸酯(PC/CPG)ELISA試劑盒 
小鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒 
小鼠神經絲蛋白(NF)ELISA試劑盒 
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)ELISA試劑盒 
小鼠*/*蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒 
小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 
小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試劑盒 
小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 
小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒 
大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒 
小鼠抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒 
小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)ELISA試劑盒 
小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒 
小鼠氧化型*(GSGS)ELISA試劑盒 
小鼠還原型*(GSH)ELISA試劑盒 
小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒 
小鼠c-fos ELISA試劑盒 
小鼠c-jun ELISA試劑盒 
小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISA試劑盒 
小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒 
小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 
小鼠Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)ELISA試劑盒 
小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒 
小鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒 
小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP-6)ELISA試劑盒 
小鼠肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 
小鼠*(LZM)ELISA試劑盒 
小鼠β連環蛋白/聯蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒 
小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISA試劑盒 
小鼠垂體腺苷酸環化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒 
小鼠血管緊張素轉化酶(ACE)ELISA試劑盒 
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 
小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA試劑盒 
小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒 
小鼠腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒 
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒 
小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒 
小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP-6)ELISA試劑盒 
小鼠巨噬細胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA試劑盒 
小鼠肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 
小鼠*(LZM)ELISA試劑盒 
小鼠可溶性CD30(sCD30)ELISA試劑盒 
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒 
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒 
小鼠粘蛋白/粘液素C(MUCC) ELISA試劑盒 
小鼠血管緊張素轉化酶(ACE)ELISA試劑盒
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒
小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA試劑盒
小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒
小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 
小鼠腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒
小鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒 
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒
小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒
小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒
小鼠堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 
小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒 
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒
小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA試劑盒
小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒
小鼠CD30分子(CD30)ELISA試劑盒
小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA試劑盒 
小鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒
小鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒
小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒
小鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒 
小鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒
小鼠Slit2 ELISA試劑盒