本試劑僅供研究使用     

試驗原理：

Neopterin試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知Neopterin濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將Neopterin和*標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中Neopterin的濃度呈比例關系。

試劑盒內容及其配制

試劑盒成份（2-8℃保存）

96孔配置

48孔配置

配制

96/48人份酶標板

1塊板（96T）

半塊板（48T）

即用型

塑料膜板蓋

1塊

半塊

即用型

標準品：80nmol/L

1瓶（0.6ml）

1瓶（0.3ml）

按說明書進行稀稀

空白對照

1瓶（1.0ml）

1瓶（0.5ml）

即用型

標準品稀釋緩沖液

1瓶（4.0ml）

1瓶（2.0ml）

即用型

*標記的抗Neopterin抗體

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

親和鏈酶素-HRP

1瓶（8.0ml）

1瓶（4.0ml）

即用型

洗滌緩沖液

1瓶（20ml）

1瓶（10ml）

按說明書進行稀釋

底物A

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

底物B

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

終止液

1瓶（6.0ml）

1瓶（3.0ml）

即用型

標本稀釋液

1瓶（12ml）

1瓶（6.0ml）

即用型

自備材料

蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項

試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法

血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備

標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：

80 nmol/L

（6號標準品）

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。

40 nmol/L

（5號標準品）

100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液

20 nmol/L

（4號標準品）

100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液

10 nmol/L

（3號標準品）

100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液

5.0 nmol/L

（2號標準品）

100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液

2.5 nmol/L

（1號標準品）

100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液

0 nmol/L

（空白對照）

原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實驗方案

標準品濃度（nmol/L）

A

80

80

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

B

40

40

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

C

20

20

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

D

10

10

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

E

5.0

5.0

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

F

2.5

2.5

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

G

0

0

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

H

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

局限

6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細胞因子反應。

3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

結 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的Neopterin標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的Neopterin含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍：0-80nmol/L

4、敏感度： 0.1 nmol/L

小鼠apelin 12（AP12）ELISA試劑盒 Mouse apelin 12,AP12 ELISA試劑盒
小鼠α干擾素（IFN-α）ELISA試劑盒 Mouse Interferon α,IFN-α ELISA試劑盒
小鼠丙酮酸激酶（PK）ELISA試劑盒  Mouse pyruvate kinase,PK ELISA試劑盒
小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒 Mouse rudimental bovine serum albumin check-up ELISA試劑盒
小鼠腫瘤標志物（CA724）ELISA試劑盒 Mouse CA724 ELISA試劑盒
小鼠*Ⅱ（FⅡ）ELISA試劑盒 Mouse coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA試劑盒
小鼠內毒素（ET）ELISA試劑盒 Mouse endotoxin,ET ELISA試劑盒
小鼠心鈉肽（ANP）ELISA試劑盒 Mouse Atrial Natriuretic Peptide,ANP ELISA試劑盒 
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）ELISA試劑盒 Mouse Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA試劑盒
小鼠毒性休克綜合征毒素1（TSST-1）ELISA試劑盒  Mouse toxic shock syndrome toxin,TSST-1 ELISA試劑盒
小鼠*A（CsA）ELISA試劑盒 Mouse Cyclosporine A,CsA ELISA試劑盒
小鼠補體1抑制物抗體（C1INH）ELISA試劑盒  Mouse Complement 1 inhibitor autoantibody,C1INH ELISA試劑盒
小鼠*A（CsA）ELISA試劑盒 Mouse Cyclosporine A,CsA ELISA試劑盒
小鼠對氨基苯甲酸（PABA）ELISA試劑盒 Mouse para-aminobenzoic acid,PABA ELISA試劑盒 
小鼠超敏C反應蛋白（hs-CRP）ELISA試劑盒 Mouse high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA試劑盒
小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M（β2-GP1 IgA/G/M）ELISA試劑盒 Mouse β2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M,β2-GP1 IgA/G/M ELISA試劑盒
小鼠T細胞活化連接蛋白（LAT）ELISA試劑盒 Mouse Linker for activation of T cell,LAT ELISA試劑盒 
小鼠抗子宮內膜抗體（EMAb）ELISA試劑盒 Mouse Endometrium Antibody,EMAb ELISA試劑盒
小鼠低密度脂蛋白免疫復合物（LDL-IC）ELISA試劑盒 Mouse LDL-IC ELISA試劑盒
小鼠解脲脲原體抗體（UU-Ab）ELISA試劑盒  Mouse Ureaplasma urealyticum antibody,UU-Ab ELISA試劑盒 
小鼠神經膠質纖維酸性蛋白（GFAP）ELISA試劑盒 Mouse glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA試劑盒
小鼠抗中性粒細胞核周抗體（pANCA）ELISA試劑盒 Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA試劑盒
小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM（PI Ab-IgG/IgM）ELISA試劑盒 Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA試劑盒 
小鼠15脂加氧酶（15-LO/LOX）ELISA試劑盒 Mouse 15-lipoxygenase,15-LO/LOX ELISA試劑盒
小鼠β干擾素（IFN-β/IFNB）ELISA試劑盒  Mouse Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA試劑盒 
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）ELISA試劑盒 Mouse Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA試劑盒
小鼠血清淀粉樣蛋白A（SAA）ELISA試劑盒 Mouse Serum amyloid A,SAA ELISA試劑盒
小鼠抗中性粒/中心體抗體（ACA）ELISA試劑盒  Mouse anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISA試劑盒 
小鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白（Hpt/HP）ELISA試劑盒 Mouse Haptoglobin,Hpt/HP ELISA試劑盒
小鼠16α羥基雌酮1（16-α OHE-1）ELISA試劑盒 Mouse 16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISA試劑盒
小鼠α1酸性糖蛋白（α1-AGP）ELISA試劑盒 Mouse α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA試劑盒
小鼠內皮型一氧化氮合成酶3（eNOS-3）ELISA試劑盒 Mouse Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA試劑盒
小鼠*酯轉移蛋白（CETP）ELISA試劑盒 Mouse cholest erolester transfer protein,CETP ELISA試劑盒
小鼠促黃體激素（LH）ELISA試劑盒 Mouse luteotropic hormone,LH ELISA試劑盒
小鼠血管緊張素原（aGT）ELISA試劑盒 Mouse angiotensinogen,aGT ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白60（Hsp-60）ELISA試劑盒 Mouse heat shock protein 60,hSP-60 ELISA試劑盒
小鼠絨毛膜*（CG）ELISA試劑盒 Mouse Chorionic Gonadotrophin,CG ELISA試劑盒
小鼠丙二醛（MDA）ELISA試劑盒 Mouse malondialchehyche,MDA ELISA試劑盒
小鼠超氧化物歧化酶（SOD）ELISA試劑盒 Mouse Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA試劑盒
小鼠C肽（C-Peptide）ELISA試劑盒  Mouse C-Peptide ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）ELISA試劑盒 Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISA試劑盒
小鼠血清總補體（CH50）ELISA試劑盒 Mouse 50% complement hemolysis,CH50 ELISA試劑盒
小鼠可溶性CD86（B7-2/sCD86）ELISA試劑盒 Mouse soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISA試劑盒
小鼠胰島素（INS）ELISA試劑盒 Mouse Insulin,INS ELISA試劑盒
小鼠低氧誘導因子1α（HIF-1α）ELISA試劑盒 Mouse hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISA試劑盒
小鼠新生甲狀腺素（NN-T4）ELISA試劑盒 Mouse Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA試劑盒
小鼠胰淀素（Amylin）ELISA試劑盒 Mouse Amylin ELISA試劑盒
小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸（Free-T3）ELISA試劑盒 Mouse Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA試劑盒
小鼠白三烯C4（LTC4）ELISA試劑盒 Mouse Leukotriene C4,LT-C4 ELISA試劑盒
小鼠*（Cyt-C）ELISA試劑盒 Mouse Cytochrome-C,Cyt-C ELISA試劑盒
小鼠游離甲狀腺素（FT4）ELISA試劑盒 Mouse Free Thyroxine,FT4 ELISA試劑盒
小鼠血管緊張素Ⅰ（Ang-Ⅰ）ELISA試劑盒 Mouse angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA試劑盒
小鼠黑色素細胞抗體（MC Ab）ELISA試劑盒 Mouse melanocyte antibody,MC Ab ELISA試劑盒
小鼠甲狀腺素（T4）ELISA試劑盒 Mouse thyroxine,T4 ELISA試劑盒
小鼠二肽基肽酶Ⅳ（DPPⅣ）ELISA試劑盒 Mouse dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA試劑盒
小鼠過敏毒素/補體片斷4a（C4a）ELISA試劑盒 Mouse Complement fragment 4a,C4a ELISA試劑盒
小鼠三碘甲狀腺原氨酸（T3）ELISA試劑盒 Mouse Tri-iodothyronine,T3 ELISA試劑盒
小鼠補體片斷（C）ELISA試劑盒 Mouse Complement fragment ,C ELISA試劑盒
小鼠補體片斷3a（C3a）ELISA試劑盒 Mouse Complement fragment 3a,C3a ELISA試劑盒
小鼠17羥孕酮（17-OHP）ELISA試劑盒 Mouse 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA試劑盒
小鼠卵泡抑素（FS）ELISA試劑盒 Mouse Follistatin,FS ELISA試劑盒
小鼠組織蛋白去乙酰化酶（HD）ELISA試劑盒 Mouse Histone Deacetylase,HD ELISA試劑盒
小鼠雌三醇（E3）ELISA試劑盒 Mouse Estriol,E3 ELISA試劑盒
小鼠雄烯二酮（ASD）ELISA試劑盒 Mouse Androstenedione,ASD ELISA試劑盒
小鼠游離睪酮（F-TESTO）ELISA試劑盒 Mouse Free Testoterone,F-TESTO ELISA試劑盒
小鼠睪酮（T）ELISA試劑盒 Mouse Testoterone,T ELISA試劑盒
小鼠孕激素/孕酮（PROG）ELISA試劑盒  Mouse Progesterone,PROG ELISA試劑盒
小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基（sRANKL）ELISA試劑盒 Mouse soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA試劑盒
小鼠降鈣素（CT）ELISA試劑盒 Mouse Calcitonin,CT ELISA試劑盒
小鼠脫氫表雄酮硫酸酯（DHEA-S）ELISA試劑盒 Mouse Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISA試劑盒
小鼠內皮素1（ET-1）ELISA試劑盒 Mouse Endothelin 1,ET-1 ELISA試劑盒
小鼠雌二醇（E2）ELISA試劑盒 Mouse Estradiol,E2 ELISA試劑盒
小鼠*（Cortisol）ELISA試劑盒 Mouse Cortisol ELISA試劑盒
小鼠促甲狀腺素（TSH）ELISA試劑盒 Mouse Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA試劑盒
小鼠甲基化酶（Methylase）ELISA試劑盒 Mouse Methylase ELISA試劑盒
小鼠抗增殖細胞核抗原抗體（PCNA）ELISA試劑盒 Mouse proliferating cell nuclear antigen antibody,PCNA ELISA試劑盒
小鼠脂蛋白脂酶（LPL）ELISA試劑盒 Mouse lipoprotein lipase,LPL ELISA試劑盒
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP-5b）ELISA試劑盒 Mouse tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TRACP-5b ELISA試劑盒
小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽（GIP）ELISA試劑盒 Mouse Glucose-dependent insulin-releasing polypeptide,GIP ELISA試劑盒
小鼠糖原磷酸化酶同工酶II（GP-II）ELISA試劑盒 Mouse Glycogen phosphorylase II,GP-II ELISA試劑盒
小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM（GP-MM）ELISA試劑盒 Mouse Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA試劑盒
小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB（GP-BB）ELISA試劑盒 Mouse Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA試劑盒
小鼠甲狀腺素抗體（TAb）ELISA試劑盒 Mouse Thyroxine antibody,TAb ELISA試劑盒
小鼠抗促甲狀腺素受體抗體（TRAb）ELISA試劑盒 Mouse thyroid stimulating hormone receptor antidoby,TRAb ELISA試劑盒
小鼠兒茶酚胺（CA）ELISA試劑盒 Mouse catecholamine,CA ELISA試劑盒
小鼠白介素27（IL-27）ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 27,IL-27 ELISA試劑盒
小鼠白介素23（IL-23）ELISA試劑盒 Mouse Interleukin 23,IL-23 ELISA試劑盒
小鼠心肌營養(yǎng)素1（CT-1）ELISA試劑盒 Mouse cardiotrophln 1,CT-1 ELISA試劑盒
小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA（α-Fodrin IgG/IgA）ELISA試劑盒 Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA,α-Fodrin IgG/IgA ELISA試劑盒
小鼠脂蛋白α（Lp-α）ELISA試劑盒 Mouse lipoprotein α,Lp-α ELISA試劑盒
小鼠大內皮素（Big ET）ELISA試劑盒 Mouse Big Endothelin,Big ET ELISA試劑盒
小鼠*Ⅷ相關抗原（FⅧ-Ag）ELISA試劑盒 Mouse coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA試劑盒
小鼠*Ⅸ（FⅨ）ELISA試劑盒 Mouse Fcoagulation factor Ⅸ,FⅨ ELISA試劑盒
小鼠*Ⅹ（FⅩ）ELISA試劑盒 Mouse coagulation factor Ⅹ,FⅩ ELISA試劑盒
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子（vWF）ELISA試劑盒 Mouse von Willebrand Factor,vWF ELISA試劑盒
小鼠前心鈉肽（Pro-ANP）ELISA試劑盒 Mouse Pro Atrial Natriuretic Peptide,Pro-ANP ELISA試劑盒
小鼠N端前腦鈉素（NT-proBNP）ELISA試劑盒 Mouse N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA試劑盒
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物（PAP）ELISA試劑盒 Mouse plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA試劑盒
小鼠*抗*復合物（TAT）ELISA試劑盒 Mouse thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA試劑盒
小鼠抗*受體（ATR）ELISA試劑盒 Mouse anti-thrombin receptor,ATR ELISA試劑盒
小鼠*受體（TR）ELISA試劑盒 Mouse thrombin receptor,TR ELISA試劑盒
小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ（cTn-Ⅰ）ELISA試劑盒 Mouse cardiac troponin Ⅰ,cTn-Ⅰ ELISA試劑盒
小鼠磷酸肌醇3激酶（PI3K）ELISA試劑盒 Mouse Phosphotylinosital 3 kinase,PI3K ELISA試劑盒
小鼠β內啡肽（β-EP）ELISA試劑盒 mouse Beta-Endorphin,β-EP ELISA試劑盒
小鼠缺血修飾白蛋白（IMA）ELISA試劑盒 Mouse Ischemia Modified Albumin,IMA ELISA試劑盒
小鼠蛋白激酶B（PKB）ELISA試劑盒 Mouse protein kinase B,PKB ELISA試劑盒
小鼠分泌型免疫球蛋白A（sIgA）ELISA試劑盒 Mouse secretory immunoglobulin A,sIgA ELISA試劑盒
小鼠血紅素氧合酶2（HO-2）ELISA試劑盒 Mouse heme oxygenase 2,HO-2 ELISA試劑盒
小鼠骨膠原交聯（Cr）ELISA試劑盒 Mouse Crosslaps,Cr ELISA試劑盒
小鼠促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒 mouse follicle-stimulating hormone,FSH ELISA試劑盒
小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽（CⅠCP）ELISA試劑盒 Mouse cross-linked C-opeptides of Type Ⅰ collagen,CⅠCP ELISA試劑盒
小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉（DPD）ELISA試劑盒 Mouse deoxypyridinoline,DPD ELISA試劑盒
小鼠吡啶交聯物（PY）ELISA試劑盒 Mouse pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA試劑盒