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技術文章
幽門螺桿菌的培養(yǎng)
點擊次數(shù)：1760 發(fā)布時間：2013-5-21
hbzhan內容導讀：幽門螺桿菌的培養(yǎng)幽門螺桿菌是一種單極、多鞭毛、末端鈍圓、螺旋形彎曲的細菌。長2.5～4.0μm，寬0.5～1.0μm。在胃粘膜上皮細胞表面常呈典型的螺旋狀或弧形。在固體培養(yǎng)基上生長時，除典型的形態(tài)外，有時可出現(xiàn)桿狀或圓球狀。
用于培養(yǎng)的胃粘膜活檢標本應置于生理鹽水、營養(yǎng)肉湯或20%葡萄糖中，然后立即轉送到細菌室培養(yǎng)。如果標本不能在4個小時內培養(yǎng)，就應放在4℃保存，但不宜超過24小時。長期保存用于培養(yǎng)的活檢標本的*方法是將其置于－70。C或液氮之中。培養(yǎng)幽門螺桿菌的培養(yǎng)基包括非選擇性及選擇性兩種。常用的非選擇性培養(yǎng)基基礎為腦心浸液瓊脂、哥倫比亞瓊脂、胰蛋白胨大豆瓊脂以及Wilkins-Chalgren瓊脂。培養(yǎng)基中需加7%－10%的去纖維蛋白馬血。羊血、人血、馬血清、氯化血紅素、淀粉、*或環(huán)糊精（cyclo幽門螺桿菌dextrins）也可代替馬血。
選擇培養(yǎng)基則是在上述培養(yǎng)基中添加一定的抗菌藥物，如*、啶酸、*、*以及甲氧芐氨嘧啶（TMP）。常用的有Skirrow配方及Dent配方。前者原用于彎曲菌的培養(yǎng)，亦可用于幽門螺桿菌培養(yǎng)。后者為前者的改良，即將多粘菌素用頭孢磺啶取代，因為少數(shù)（5%左右）幽門螺桿菌菌株對多粘菌素敏感。Drnt配方為*（10mg/L）、頭孢磺啶（5mg/L）、TMP（5mg/L）以及*（5mg/L）。有報道指出，部分菌株對啶酸敏感，因而培養(yǎng)基中應盡量避免作用該抗生素。
用于培養(yǎng)的胃粘膜活檢標本應置于生理鹽水、營養(yǎng)肉湯或20%葡萄糖中，然后立即轉送到細菌室培養(yǎng)。如果標本不能在4個小時內培養(yǎng)，就應放在4℃保存，但不宜超過24小時。長期保存用于培養(yǎng)的活檢標本的*方法是將其置于－70。C或液氮之中。培養(yǎng)幽門螺桿菌的培養(yǎng)基包括非選擇性及選擇性兩種。常用的非選擇性培養(yǎng)基基礎為腦心浸液瓊脂、哥倫比亞瓊脂、胰蛋白胨大豆瓊脂以及Wilkins-Chalgren瓊脂。培養(yǎng)基中需加7%－10%的去纖維蛋白馬血。羊血、人血、馬血清、氯化血紅素、淀粉、*或環(huán)糊精（cyclo幽門螺桿菌dextrins）也可代替馬血。
選擇培養(yǎng)基則是在上述培養(yǎng)基中添加一定的抗菌藥物，如*、啶酸、*、*以及甲氧芐氨嘧啶（TMP）。常用的有Skirrow配方及Dent配方。前者原用于彎曲菌的培養(yǎng)，亦可用于幽門螺桿菌培養(yǎng)。后者為前者的改良，即將多粘菌素用頭孢磺啶取代，因為少數(shù)（5%左右）幽門螺桿菌菌株對多粘菌素敏感。Drnt配方為*（10mg/L）、頭孢磺啶（5mg/L）、TMP（5mg/L）以及*（5mg/L）。有報道指出，部分菌株對啶酸敏感，因而培養(yǎng)基中應盡量避免作用該抗生素。