本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷!
產(chǎn)品名稱 | 組織來源 | 大腦 | |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 產(chǎn)品貨號 | CS-X3542 |
細胞簡介:
豬腦微血管周分離自腦微血管;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面,即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。周細胞(pericyte)又稱Rouget細胞和壁細胞,是一種包圍全身毛細血管和靜脈中內(nèi)皮細胞的細胞,可以收縮。周細胞嵌入毛細血管內(nèi)皮細胞的基膜中,通過物理接觸和旁分泌信號與內(nèi)皮細胞進行細胞通訊,監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細胞的成熟過程。此外,周細胞還具有調(diào)控毛細血管血流量、細胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點之一,所以對血管周細胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細血管的血流量。周細胞和內(nèi)皮細胞之間共同擁有一個基膜,基膜上有多種細胞連接,包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細血管直徑的雙向調(diào)控;毛細血管受損時,周細胞還可增殖,分化為內(nèi)皮細胞和成纖維細胞。
原代細胞培養(yǎng)條件:
?溫度?:通常在37℃下進行,以模擬體內(nèi)溫度。
?pH值?:培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間,以維持細胞的正常生理狀態(tài)。
?氣體環(huán)境?:在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進行,以促進細胞生長。
?培養(yǎng)基?:使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,如Eagle's MEM、DMEM等。
?無菌操作?:整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進行,以防止污染。
方法簡介:
實驗室分離的豬腦微血管周經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的豬腦微血管周采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下:
?組織處理?:將動物組織從機體中取出,剪碎后用等消化酶處理,使其分散成單個細胞。
?細胞計數(shù)?:使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù),確保細胞密度適中。
?接種培養(yǎng)?:將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中,加入適量的培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?換液和傳代?:定期更換培養(yǎng)液,當(dāng)細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng),以維持細胞的生長狀態(tài)。
原代細胞的4種培養(yǎng)方法:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用
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