本產品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！
產品名稱 | 組織來源 | 骨骼肌 | |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 產品貨號 | CS-X3541 |
細胞簡介：
豬骨骼肌衛星分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區段，叫做一個肌節。肌衛星細胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維（肌細胞）外的一種扁平、有突起的細胞。著于肌纖維（肌細胞）表面；當肌纖維（肌細胞）受損后，肌衛星細胞可增殖分化，參與肌纖維（肌細胞）的修復，因此具有干細胞性質。
原代細胞培養條件：
?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內溫度。
?pH值?：培養液的pH值應保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態。
?氣體環境?：在含有5% CO2的培養箱中進行，以促進細胞生長。
?培養基?：使用含有適當營養成分的培養基，如Eagle's MEM、DMEM等。
?無菌操作?：整個培養過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。
方法簡介：
實驗室分離的豬骨骼肌衛星經Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質量檢測：
實驗室分離的豬骨骼肌衛星采用-膠原酶混合消化法結合多次差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養基：含FBS、馬血清、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右；3代以內狀態佳
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
原代細胞培養的具體操作步驟如下：
?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。
?細胞計數?：使用血細胞計數器或其他方法對細胞進行計數，確保細胞密度適中。
?接種培養?：將細胞懸液接種到培養瓶中，加入適量的培養基，置于37℃、5% CO2的培養箱中培養。
?換液和傳代?：定期更換培養液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養，以維持細胞的生長狀態。
原代細胞的4種培養方法：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用
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