A4 具體操作
取出凍存管： 根據(jù)細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。
從液氮罐中取出細胞盒，取出所需的細胞，同時核對管外的編號。
初學(xué)者易犯錯誤：水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多，導(dǎo)致傳熱不佳，使融化時間延長。
離心前忘記平衡，導(dǎo)致離心機損壞和細胞丟失。
一次復(fù)蘇細胞過多，忘記更換吸頭和吸管，導(dǎo)致細胞交叉污染。
實驗前準備：將水浴鍋預(yù)熱至37℃
A4用75％酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍：

迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷的搖動，使管中的液體迅速融化。
.約-2min后

凍存管內(nèi)液體*溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺內(nèi)。
平衡離心：用架盤天平平衡后，放入離心機中3000r/min 離心3min
制備細胞懸液：吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液，吹打制成細胞懸液。
活化與細胞復(fù)蘇    收到細胞株包裹時， 請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形， 若有請立即通知。細胞株請盡速開始培養(yǎng)， 或立即冷凍保存（置于–70 °C， 隔夜后， 移到liq N2）。
 細胞復(fù)蘇的原則－快速融化：必須將凍存在-96℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。
細胞計數(shù)：細胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細胞將復(fù)合細胞計數(shù)要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi)，將培養(yǎng)瓶放入37℃和5％CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時（或者24-48小時）后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)，換液的時間由細胞情況而定。
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0033 鈉/G鈉/芐基鈉//芐//（S,5R,6R）-3,3-二甲基-6-（- 乙酰氨基）-7-氧代-4-硫雜--氮雜雙環(huán)[3..0]庚烷--甲suan"鈉鹽/Penicillin G Na salt USP級，603u/mg，有害品 69-57-8 69-57-8鈉 鈉 Penicillin G Na salt
組織培養(yǎng)級，0KU/ml，有害品 0毫升
0034 /G /芐 / 氧丙基/ 丙 /（S,5R,6R）-3,3-二甲基-6-（- 乙酰氨基）-7-氧代-4-硫雜--氮雜雙環(huán)[3..0]庚烷--甲suan" 鹽/Penicillin G Potassium salt USP級,534u/mg 3-98-4 3-98-4 Penicillin G Potassium salt
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0035- 溶液/Penicillin&Streptomycin&Amphotericin B solution,γ-Irradiated 組織培養(yǎng)級，γ-射線滅菌 0毫升 溶液 溶液 Penicillin&Streptomycin&Amphotericin B solution,γ-Irradiated