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當前位置:上海力敏實業有限公司>>生化試劑、抗體、血清>>試劑盒>> 74134RNeasy Plus Mini Kit (50)qiagen試劑盒 分子生物試劑

RNeasy Plus Mini Kit (50)qiagen試劑盒 分子生物試劑

參   考   價: 3803

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具體成交價以合同協議為準

產品型號74134

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所  在  地上海市

更新時間:2023-07-27 14:16:22瀏覽次數:1071次

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RNeasy Plus Mini Kit (50)qiagen試劑盒
RNeasy Plus Mini Kit純化得到的RNA適合對少量DNA敏感的下游應用,如定量real-time RT-PCR。純化得到的RNA還可以用于其他應用。

RNeasy Plus Mini Kit (50)qiagen試劑盒

 

原理
細胞和易裂解組織首先在含有異硫*酸胍的高變性Buffer RLT Plus中裂解和勻質化,該緩沖液能使RNases立即失活,以保證分離到完整的RNA。裂解液再流過gDNA Eliminator柱。該離心柱與高鹽緩沖液共同作用,可選擇性高效的去除基因組DNA。加入乙醇以提供RNA結合的合適條件,樣本再加入到RNeasy Mini離心柱。含有硅膠膜的特制離心柱能特異性的結合裂解細胞中的RNA。



RNeasy Plus Mini Kit (50)qiagen試劑盒

操作流程
可從多達107個細胞或30 mg組織中純化總RNA。簡潔的工作流程可在25分鐘內純化得到已去除基因組DNA的RNA(參見RNeasy Plus procedure )。樣本首先被裂解和勻質化。裂解液流過gDNA Eliminator柱,在流過gDNA Eliminator柱的溶液中加入乙醇,樣本再加上樣到RNeasy Mini離心柱。RNA結合到膜上,污染物被洗去。獲得高品質RNA,洗脫體積30 ?l或更大。
處理不同的起始樣本可用不同的實驗方案。實驗方案的不同之處主要在于樣本的裂解和勻質化。樣本上樣到gDNA Eliminator柱之后的步驟就類似。此操作流程適合富集mRNA,不包括大部分小于200 nt的RNAs(如rRNAs和tRNAs)。RNeasy Plus操作流程稍作修改后可從培養細胞中純化含miRNA等小RNAs的總RNA。
使用Buffer RLT Plus(RNeasy Plus Mini Kit提供)進行組織破碎和勻質化時,可能會產生過多泡沫。在破碎和勻漿前向Buffer RLT Plus中加入Reagent DX(單獨提供)可充分減少泡沫產生。Reagent DX經仔細檢測,表明配合此試劑盒使用不會影響RNA的純度或下游應用。

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