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Crude2Pure 制備純化系統

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更新時間:2024-04-30 09:08:03瀏覽次數:299次

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產品簡介

全自動純化系統,即Crude2Pure系統(以下簡稱C2P系統)是一種全新的制備分離所得餾分后處理方式,其特點是可在短暫的時間內完成從餾分溶液到目標物固體粉末的獲得

詳細介紹

全自動純化系統,即Crude2Pure系統(以下簡稱C2P系統)是一種全新的制備分離所得餾分后處理方式,其特點是可在短暫的時間內完成從餾分溶液到目標物固體粉末的獲得。并且在這一過程中,有效地除去了流動相中加入的添加劑,即便是已經和化合物結合成鹽的,也可以通過置換的手段得到滿足后續實驗要求的鹽的形態,由于不像旋轉蒸發需要升高溫度,所以該方式有效降低了目標化合物分解的危險。直接生成在樣品瓶中的固體粉末,免去了轉移等操作,極大程度的降低了由于多步驟操作而引入雜質或損失產物的風險。

C2P系統由捕集和回收兩個子系統構成(圖1)。捕集系統根據化合物的極性和疏水特性通過一定比例和組成的流動相將餾分溶液輸送通過C2P捕集柱,目標化合物將被保留在捕集柱中。將該捕集柱轉移至回收系統,選擇需要的化合物形態(鹽,游離堿等)后,回收系統通過沖洗C2P捕集柱去除多余的流動相添加劑,轉化成鹽形態,除水等步驟后,以二氯甲烷-甲醇溶劑洗脫目標化合物,同時輔以加熱和氮氣干燥,進而在3小時內得到目標化合物的固體粉末。

1. 工作方式介紹
1.1 基本工作流程

C2P 系統由兩個子系統構成,分別為捕集系統和回收系統。下圖簡要說明了該系統的工作流程。通過制備液相色譜獲得的化合物目標餾分,根據在通用色譜方法下測定其保留時間以獲得其疏水作用特定,從而選擇合適的流動相將餾分中的目標化合物捕集到C2P捕集柱后再通過回收系統將化合物從捕集柱洗脫并進行粉末化處理。回收系統在化合物處理完畢之后會自動進行捕集柱的清洗。

圖 2 C2P系統的工作流程圖

1.2 溶液及流動相

含有酸的水相和有機相組成的的反相色譜流動相是推薦的樣品溶液,另外制備色譜分離時的化合物保留時間對捕集過程中流動相的選擇是很有幫助的。為保證良好的效果,需要保證C2P捕集柱的上樣體積在 50 mL以內。

1.3 目標化合物的保留時間確認

C2P系統中的捕集系統會根據目標化合物的保留時間判斷化合物的疏水性能,從而確定捕集過程中所用流動相的類型和比例,以及上樣泵和補償泵的流速比例。

保留時間的確定可以使用反相高效液相色譜,如島津 HPLC或 UHPLC系統來確定,使用通用的液相方法,如0.1%甲酸或三氟醋酸水溶液-有機溶劑流動相體系,對于HPLC梯度變化可以為0-10%B(0-2min)_10-4 0%B(2-8min)_40-60%%B(8 -12min)_60-80%B(12-16min)_80%B(16-20min),對于UHPLC則為,0-10%B(0-0.5 min)_10-40%B(0.5-2min)_40-60%B(2-3min)_60-80%B(3--4min)_80%B(4-5min)。分析析結果通過下表對應的的數據來確定捕集系統流動相組成。

1.4 捕集系統流動相組成

捕集系統準備了4 種流動相用于目標化合物在C2P 捕集柱上的捕集,流動相類型同表1 中的時間區帶相對應關系如表3。

在捕集操作時,輸入所需捕集的化合物保留時間,捕集程序根據表1 中保留時間的預先設置獲得該化合物所在的區帶信息,然后根據表3 中設定自動選擇對應的上樣泵和補償泵的溶劑溶劑及流速,完成對該樣品的捕集操作。

表 3 捕集系統流動相比例和流速

區帶 流動相 流速(mL/min)
A 上樣泵 A 10
補償泵 A 30
B 上樣泵 B 10
補償泵 B 50
C 上樣泵 C 10
補償泵 B 40

1.5 回收過程

捕集進程結束后,開始樣品回收過程?;厥者^程準備了前處理、后處理和洗脫三個過程多種流動相(見表4)。前處理泵以前處理流動相A 對已捕集過樣品的捕集柱進行清洗,除去流動相中的背景物質后,再根據待測化合物粉末形態要求選擇對應的流動相。

前處理結束后,洗脫泵輸送洗脫流動相A,利用極性差別而不能混溶的原理,頂替去除捕集柱中的前處理流動相,然后再使用洗脫流動相A 洗脫目標樣品于樣品管中,在同步加熱和氮吹作用下迅速揮干溶劑形成目標化合物固體粉末。

2. 操作過程簡要介紹
2.1 捕集過程

捕集柱安裝入專用的捕集柱架后,置入捕集系統中。通過軟件Open Solution C2P 設置捕集柱位置和對應化合物信息等內容后,啟動捕集過程,單個樣品的捕集在半小時之內完成。

圖 3  捕集系統準備

2.2 回收過程

捕集結束后,將捕集柱架放置入回收系統的相應位置,啟動Open Solution C2P,系統進行自動化溶劑回收處理,3小時以內結束回收操作,最終粉末化結果如圖2所示。

3 結論

島津Crude2Pure 系統可以在3小時內快速完成目標化合物餾分的自動粉末化操作,比傳統的樣品分離純化后處理方法節省處理時間3 倍以上,并且該對樣品的處理過程不受樣品結構特點和性質的影響,實驗證明可以適合大多數化合物的處理;操作方式快捷簡便,易于掌握,因此,該系統在天然產物提取分離純化和合成有機化合物的研究中有廣泛的應用前景。


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