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PACAP檢測試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號48T/96T

品       牌其他品牌

廠商性質生產商

所  在  地上海市

更新時間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數:332次

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PACAP檢測試劑盒稀釋——加樣——溫育——配液——洗滌——加酶——溫育——洗滌——顯色——終止——測定

樣品收集、處理及保存方法:
1、   血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、   血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、   細胞上清液---1000×g離心10分鐘除顆粒和聚合物。
4、   組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5、   保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

產品名稱

 PACAP檢測試劑盒

英文名稱

 Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide, PACAP Elisa Kit

貨號

 XG00H199

?測定步驟:

1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。


實驗原理:
是采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
標本要求:
1. 血清::溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 血漿:根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3. 尿液:無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。
下面就一些常見ELISA操作過程中的問題一一分析。
1.樣品稀釋 酶聯免疫反應是一種敏感性很高的反應,如果血清不稀釋,不可避免會產生很強的非特異性反應,出現假陽性。因此,國外檢測血清抗體的試劑盒,均規定將血清稀釋至適當的倍數,以降低非特異性反應,使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。一般產品的樣品稀釋倍數均通過大量試驗確定,以保證試驗的靈敏度和特異性。但是,有些用戶未能嚴格按使用說明書操作,如某些產品應取10μl樣品進行稀釋,個別用戶取5μl甚至1μl樣品進行稀釋,由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠,因此造成樣品稀釋倍數不準確,檢測結果出現問題。
2.試劑盒平衡 試劑盒中所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育時間相對縮短,ELISA反應不夠充分。冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。 
3.樣品和試劑的混勻 稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性。
下列是公司是正在*的產品:

蜂斗菜內酯DMEMw/1,0g/lGlucw/25mMHepes,500ml

甘氨 UltraMEMw/ITES500ml

甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷HBSS,w/oCa++,Mg++w/phenolred,1L

高車前苷 Schneider'sDrosophilaMedium,Mod.,1L

高車前素IMDMw/25mMHEPES500ml

藁本內酯DPBS-10xw/oCa,Mg1L

鉤吻素子DMEM:F-121:1w/15mMHepes,L-Gln500ml

枸橘苷DMEM4,5g/LGlu,25mMHEPE,w/oL-Gln500ml

枸櫞血根堿Gentamicin50mg/ml1x10mlscrewcap

桂皮醛 DMEMhighglucosew/oNaPyruvate500ml

桂皮,肉桂 DMEM4.5g/LGlucosew/oL-Gln,PR,500ml

漢防己素Pen/Strep/Fungizone10K/10K/25ug,20ml

漢防己素L-Glutamine200mM500ml

何首烏苷TrypanBlue0.4%0.85%NaCl,100ml

黑介子苷Trypsin(10x)2.5%inHBSSw/oCa,Mg100ml
PACAP檢測試劑盒鹽地匹福林(標準品)Anti-IP10antibody

鹽地匹福林雜質A(標準品)Anti-TNFalphaantibody[NF-7]

鹽卡因(標準品)RecombinanthumanIP10protein

鹽卡因雜質(對氨基苯)(標準品)RecombinanthumanIP10protein

鹽咯地爾(標準品)Anti-IL-4antibody

鹽螺環酮(標準品)RecombinantratIL-4protein

鹽度洛西汀(標準品)RecombinanthumanTARC/CCL17protein

鹽多巴酚胺雜質(標準品)RecombinanthumanTARC/CCL17protein

鹽*/鹽*(標準品)Anti-G-CSFantibody[5D7]

鹽*(標準品)Anti-CX3CL1antibody

鹽多沙普侖(標準品)RecombinanthumanCX3CL1protein

鹽多佐胺;鹽杜塞酰胺(標準品)RecombinanthumanCX3CL1protein

鹽*(標準品)Anti-GrowthHormoneantibody[GH-1]

鹽二弗林(標準品)Anti-GrowthHormoneantibody[GH-2]

鹽二雙胍(標準品)Anti-Leptinantibody

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