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上海邦景實業有限公司

主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種

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原代CIK細胞添加劑
原代CIK細胞添加劑
參考價2131
具體成交價以合同協議為準
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    上海市

規格
5ML(100X)2131元15 瓶 可售

更新時間:2024-03-13 14:42:47瀏覽次數:236

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【簡單介紹】
規格 5ML(100X) 產品別名 原代CIK細胞添加劑
貨號 BJ-X2422 用途 僅用于科研、不得用于臨床
原代CIK細胞添加劑的相關產品:人支氣管上皮細胞人肥大細胞小鼠胚胎成纖維細胞人慢性髓系白血病細胞小鼠小膠質細胞人心肌細胞小鼠單核巨噬細胞白血病細胞人皮膚成纖維細胞人肝星狀細胞人急性單核細胞白血病細胞

細胞傳代培養操作步驟如下:

1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態和生長密度,當細胞生長密度達到80%~90%時,即可進行傳代。

2)吸掉或倒掉培養瓶內的培養液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。

3)根據培養瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的,一般應覆蓋整個培養瓶底。

4)把培養瓶放入37℃ CO2培養箱進行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時,再輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落,然后立即加入2倍量的培養液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。

5)吸出所有細胞懸液至離心管內,1000rpm/min離心3~5min

6)棄上清,加入適量培養液重懸細胞,輕輕吹打混勻,使細胞均勻分散。

7)用吸頭吸取適量細胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養瓶中,補足培養液,搖勻,放置于37℃ CO2培養箱中進行培養。

8)根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間,甚至進行細胞凍存。

產品簡介:

產品名稱

規格

貨號

原代CIK細胞添加劑

5ML(100X)

BJ-X2422

 

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細胞培養具體步驟:

一、常用設備

1. 準備室的設備

單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺。配液室的設備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)。

2. 培養室的設備

液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統、低溫冰箱(-80℃)、空調、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實驗記錄)。

3. 必須放在無菌間的設備

離心機(收集細胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、4℃冰箱(放置serum和培養用液)。

二、無菌操作

(一)無菌室的滅菌

1.定期打掃無菌室:每周打掃一次,先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等,然后用3‰來蘇爾或新潔爾滅或0.5%過氧乙酸擦拭。

2.CO2孵箱(培養箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%過氧乙酸,再用紫外燈照射。

3.實驗前滅菌:打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統各20-30分鐘。

4.實驗后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺。

細胞培養方法:

01 原代培養操作步驟

原代培養的操作步驟為:取材分離培養。

1)取材:對于不同的組織有不同的取材方法,但均應保持材料的新鮮及嚴格無菌。

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注意事項:

1)嚴格進行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細胞發生污染。

2)所用培養液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞,對培養液的要求不一樣,必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養液。

3)胎牛血清對于維持細胞生存,促進細胞生長起著關鍵作用。可根據文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應保持用至實驗完成。

4)消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不,收集到的細胞數量少,或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離,這時的細胞已有損傷或死亡,影響細胞數量和實驗進度。

5)細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠,或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后,應先彈散細胞沉淀,再加入培養液重懸,這樣比直接吹打對細胞損傷小,可以提高細胞活率。

6)吹打細胞時應盡量避免細胞的產生,以免損傷細胞,影響細胞狀態(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生)。

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