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上海邦景實業有限公司
主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |

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更新時間:2022-12-04 09:50:26瀏覽次數:325
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商品屬性:
產品名稱:人胚肺細胞:MRC-5
貨號:BJ-X96480
規格:1×10?cells/T25培養瓶
分類:細胞系
商品介紹:
名稱 MRC-5 (人胚肺細胞) 種屬 人類 年齡(性別) 胎兒,14周齡 組織來源 肺 生長特性 貼壁細胞 細胞形態 成纖維細胞樣 背景描述 MRC-5細胞來自14周齡男性胎兒的正常肺組織;MRC-5細胞老化前能傳代42-46次群體倍增。MRC-5細胞是正常二倍體細胞系,46條染色體、XY核型。模式染色體數為46,概率為70%。 生物安全等級 1 生長培養基 MEM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例 1:2-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~36-96小時 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 注意事項 該細胞為有限傳代細胞系,請注意代次控制。 保藏機構 ATCC; CCL-171 ECACC; 97112601 |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:產品僅用于科研
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
超級雜交液 ( 芯片 )10mL 角膜上皮細胞生長因子5mL
超級雜交液 ( 原位雜交 )10mL 膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒50 次
DNA 探針變性液10mL 膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒100 次
SSC 溶液 ,20×100mL 堿性膠電泳液 ,10×250mL
SSPE 溶液 ,20×100mL 剪切式勻漿機1臺
caspase-3活性檢測試劑盒分光光度法 20T
caspase-6活性檢測試劑盒分光光度法 20T、50T、100T
caspase-8活性檢測試劑盒分光光度法 20T、50T、100T
caspase-9活性檢測試劑盒分光光度法 20T、50T、100T
細胞周期檢測試劑盒微板比色法 100T
人胚肺細胞:MRC-5大鼠賴氨酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)elisa檢測試劑盒
大鼠蘭尼定受體1(RYR1)elisa檢測試劑盒
大鼠3/色5單加氧酶激活蛋白ζ(YWHAζ)elisa檢測試劑盒
大鼠蛋白激酶JAK3(Jak3)elisa檢測試劑盒
大鼠蛋白激酶JAK3(Jak3)elisa檢測試劑盒免費代測
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。