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B95-8細胞,絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞

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更新時間：2017-11-13 11:56:08瀏覽次數(shù)：261次

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產(chǎn)品簡介

上海研盟生物提供美國ATCC傳代細胞株“B95-8細胞,絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞"，進口來源，國內(nèi)保種，活性保證，咨詢：.

詳細介紹

【友情提示】：產(chǎn)品價格與說明書請?zhí)砑涌头騺黼娫儍r，索要說明書；

產(chǎn)品名稱：B95-8細胞,絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞

基本特性：
C細胞數(shù)量：1000000個細胞數(shù)
E細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

凍存和復(fù)蘇原則就是：慢凍、快解凍。因為細胞內(nèi)主要成分還是水，在-20℃時細胞中的水結(jié)成冰晶，而與水相比，冰的密度小而體積大，會造成細胞器膜、細胞膜的損傷，這樣很容易導(dǎo)致細胞復(fù)蘇失敗。

細胞名稱：B95-8，EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細胞
組織來源：外周血淋巴細胞
培養(yǎng)條件：RPMI-1640+10% FBS
形態(tài)：懸??；淋巴母細胞
背景：B95-8細胞株源自暴露于人白血球中抽提的EB病毒的絨猴白血球。B95-8是一個連續(xù)株并釋放高滴度的轉(zhuǎn)染EB病毒。此細胞株提供EB病毒用于建立人的連續(xù)淋巴細胞株。

傳代時間：2-3天 3-5天

傳代比例：1:2~1:3 1:1~1:2

細胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

細胞實驗安全性：所有細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

B95-8細胞,絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞技術(shù)相關(guān)問答：
1. 如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基？培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長?？傊?，*MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始。
2. 何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。
3. 可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活。
4. 可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生*的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

操作方法

固定	培養(yǎng)細胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進行脫蠟、水化。
洗滌	玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。
反應(yīng)	洗滌后的玻片用吸水紙吸干細胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加反應(yīng)液（每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標記的-dUTP 1μL），使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。
終止反應(yīng)	去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。
FITC標記	洗滌后的玻片用吸水紙吸去細胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。
洗滌	將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。
PI復(fù)染	將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。
封片	用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。
交貨時間	7-10個工作日

，體內(nèi)、外細胞的差異和分化：

1、差異：細胞離體后，失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細胞間的相互影響，生活在缺乏動態(tài)平衡相對穩(wěn)定環(huán)境，日久天長，易發(fā)生如下變化：分化現(xiàn)象減弱；形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡；或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性，變成可無限生長的連續(xù)細胞系或惡性細胞系。因此，培養(yǎng)中的細胞可視為一種在特定的條件下的細胞群體，它們既保持著與體內(nèi)細胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能，也有一些不同于體內(nèi)細胞的性狀。實際上從細胞一旦被置于體外培養(yǎng)后，這種差異就開始發(fā)生了。

2、分化：體外培養(yǎng)的細胞分化能力并未*喪失，只是環(huán)境的改變，細胞分化的表現(xiàn)和在體內(nèi)不同。細胞是否表現(xiàn)分化,關(guān)鍵在于是否存在使細胞分化的條件，如Friend細胞（小鼠紅白血病細胞）在一定的因素作用下可以合成血紅蛋白，血管內(nèi)皮細胞在類似基膜物質(zhì)底物上培養(yǎng)時能長成血管狀結(jié)構(gòu)，雜交瘤細胞能產(chǎn)生特異的單克隆抗體，這些均屬于細胞分化行為。

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