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NCI-H1703 (人肺鱗癌細胞)

參  考  價:900 - 3800 /瓶
具體成交價以合同協議為準
  • 型號

  • 品牌

    其他品牌

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    代理商

  • 所在地

    上海市

更新時間:2024-07-15 17:50:28瀏覽次數:258次

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規格 1×106cells/T25培養瓶 種屬
貨號 CS-X2388 細胞形態 上皮細胞樣
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產品信息:

貨號

CS-X2388

種屬

生長特性

貼壁細胞

細胞形態

上皮細胞樣

溫度

液氮

培養條件:

氣相:空氣,95%;CO2,5%

鑒定

STR鑒定正確

生長培養基

RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

NCI-H1703 (人肺鱗癌細胞)

商品介紹:

產品名稱:NCI-H1703 (人肺鱗癌細胞)
別稱 H1703; H-1703; NCIH1703

種屬 人類

年齡(性別) 男性,54歲

組織來源

生長特性 貼壁細胞

細胞形態 上皮細胞樣

背景描述 NCI-H1703細胞是于1987年建系,源自一位54歲患有非小細胞肺癌的白人男性,該患者為吸煙者。

生物安全等級 1

生長培養基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

保藏機構 ATCC; CRL-5889

細胞保存方法:

(一)細胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;

2. 取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。

3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;

4. 離心1000rpm,5min;

5. 去除,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;

6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;

7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;

8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。

NCI-H1703 (人肺鱗癌細胞)

注意事項:

1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態,約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質,應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。

2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。

3)、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。

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操作步驟:

1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基,使細胞處于指數生長期。

2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。

3)、離心收集培養之細胞,用加血清的培養基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。

4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。

 


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