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卡邁舒化學技術(上海)有限公司


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綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒

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產品型號48t

品       牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

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更新時間:2015-03-16 15:21:13瀏覽次數:290次

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產品簡介

卡邁舒化學技術(上海)有限公司專業研發銷售各種屬科研ELISA試劑盒,并提供無償代檢測服務,是國內多家科研機構及高校的ELISA試劑盒專業供應商,綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒質量保證,*,發貨及時,運輸嚴格,產品得到諸多單位科研工作者的認可與支持,更有專業的技術團隊用心為您的科研之路保駕護航,做您身邊的科研伴侶!

詳細介紹

綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒中內容(96孔)

1. 重組人VEGF凍干標準品,10ng/管,總2管。

2. 預包被抗人VEGF抗體的96孔板。

3. 樣品稀釋液,30ml。 

4. *標記抗人VEGF,120μl,效價1:100。

5. 抗體稀釋液,12ml。 

6. 親和素-過氧化物酶復合物(ABC),120μl,效價1:100。

7. ABC稀釋液,12ml。

8. TMB顯色液,10ml。

9. TMB終止液,10ml。

綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材

1. 標準規格酶標儀。

2. 自動洗板機。 

3. 系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器。

4. 干凈的試管和Eppendof管。 

5. 使用中性PBS或TBS作為洗滌液。0.01M TBS配法為:1000ml H2O中加Tris 1.2g, NaCl 8.5g;  純乙酸450μl或濃鹽酸700μl左右調節pH值(7.2-7.6)。 0.01 M PBS(pH7.2-7.6)配法:1000ml蒸餾水中加氯化鈉8.5g, Na2HPO4·12H2O 3.5g, NaH2PO4·2H2O  0.25g。

洗板方法 

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將*的PBS或TBS洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內,浸泡1-2分鐘。根據需要,重復此過程數次。 

自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒操作程序 

所有試劑用前需在室溫平衡。試劑或樣品稀釋時,切不可忘記混勻。每次檢測都應該做標準曲線。如果估計樣品VEGF濃度>2000pg/ml時,應在試管中將樣品用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。 

1. 確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數目,并增加1孔作為TMB空白顯色孔??倲?樣品數+9;做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。 

2. 將1000pg/ml ,500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,62.5pg/ml,31.3pg/ml,15.6pg/ml的標準品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于人血清、體液、組織勻漿或細胞培養上清,每孔先加50μι樣品稀釋液,再加50μι樣品。

3. 酶標板加上蓋,37℃反應120分鐘。

4. 反應后用自動洗板機吸去酶標板內的液體(將自動洗板機的洗滌次數設為零再開始即可);或甩去酶標板內液體,再對著吸水紙拍幾下。不洗。

5. 將準備好的*抗人VEGF抗體工作液按每孔0.1ml依次加入(TMB空白顯色孔除外)。37℃反應60分鐘。 

6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。吸去或甩去多余液體。

7. 將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入(TMB空白顯色孔除外)。37℃反應30分鐘。

8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。吸去或甩去多余液體。

9. 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色液,37℃避光反應20-25分鐘(此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔差別不明顯)。 

10. 按每孔0.1ml依次加入TMB終止液,此時藍色立轉黃色。 

11. 用酶標儀在450nm測定O.D.值,將TMB空白顯色孔設為對照。 

12. 所有的標準品和樣品的吸光值減去零孔的吸光值后,在坐標紙上畫出曲線,以吸光值作為縱坐標,以濃度作為橫坐標。 

13. 根據樣品的吸光值在坐標上找出對應的濃度。用戶也可以使用各種應用軟件來計算(下載)。應記住由于樣品稀釋了1倍,其實際濃度應該×2。

綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒操作程序總結: 

1. 加樣品和標準品,37℃反應120分鐘。不洗。 

2. 加*標記抗體,37℃反應60分鐘。0.01M TBS洗滌3次。

3. 加ABC,37℃反應30分鐘。0.01M TBS洗滌5次。

4. TMB37℃反應20-25分鐘。

5. 加入TMB終止液,讀數。

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