磷脂酶A2(PLA2)測試盒_脂肪酸代謝系列
測定方法:分光光度法
產品規格:50管/24樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
磷脂酶A2(EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂酰基水解酶,廣泛存在于動植物組織、細菌、細胞核分泌物中,參與脂肪消化,精子成熟、細胞信號傳遞、脂質過氧化修復、宿主反應等生理過程,在控制體內磷脂類物質平衡、調節機體新陳代謝、參與疾病的病理進程等方面發揮著及其重要的作用。
磷脂酶A2(PLA2)測試盒_脂肪酸代謝系列
測定原理:
磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸(HEPC)產生游離巰基,與DTNB反應生成物質,在412nm處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器:
天平、超速冷凍離心機、研缽、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿。
試劑組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體×5瓶,-20℃避光保存。臨用前根據用量每瓶加入4.5mL試劑二充分混勻;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
樣品處理:
1.組織:按照質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心5min,取全部上清于4℃、100000g離心30min,棄上清,取沉淀溶于1mL試劑一。
2.細胞:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后于4℃,10000g離心5min,取全部上清于4℃、100000g離心30min,棄上清,取沉淀溶于1mL試劑一。
3.血清:直接測定。