氧化與抗氧化系列_葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒
測定方法:微量法
產品規格:100管/48樣
注 意 :正式測定前取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
GOD(EC 1.1.3.4)廣泛存在于動物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產生H2O2,是生物體中產生活性氧的代謝途徑之一。
氧化與抗氧化系列_葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒
測定原理:
GOD催化產生H2O2,過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基偶聯酚,生成有色化合物,在500 nm有特征吸收峰,顏色深淺與GOD活性成線性關系。
試驗中所需的儀器和設備:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水
試劑的組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
緩沖液:液體30mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入10mL緩沖液充分溶解待用;用不完的試劑4℃保存一個月;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入10mL緩沖液充分溶解待用;用不完的試劑4℃保存一個月;
樣品測定的準備:
1、細菌、細胞或組織樣品的制備:
細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。