表面膜免疫球蛋白A（mIgA）檢測(cè)試劑盒英文名稱Human membrane IgA,mIgA ELISA Kit 齊一生物科技（上海）有限公司試劑種類眾多：覆蓋分析化學(xué)品,無(wú)機(jī)化學(xué)品,有機(jī)化學(xué)品,生物化學(xué)品,材料化學(xué)品.試劑信息齊全：包含試劑特性描述,詳細(xì)質(zhì)量信息,應(yīng)用方法、標(biāo)準(zhǔn),用途以及正在開(kāi)發(fā)的前沿應(yīng)用

表面膜免疫球蛋白A（mIgA）檢測(cè)試劑盒ELISA試劑盒操作步驟
ELISA試劑盒使用前,將所有試劑充分混勻.不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差.
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù).每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔.每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔.標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi).
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi).立即加入50ul的標(biāo)記的抗體.蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí).
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干.重復(fù)此操作3次.如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次.
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘.
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干.重復(fù)此操作3次.如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次.
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘.避免光照.
取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果.
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值.
ELISA操作步驟
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)材料,試劑,溶液
1．酶標(biāo)板,100μltip頭,1mlEp管,濕盒
2．包被稀釋液（0.05mol/L碳酸鈉-碳酸氫鈉buffer,pH9.6）
碳酸鈉0.15g,碳酸氫鈉0.29g,疊氮鈉0.02g,加雙蒸水至100ml,調(diào)至pH9.6
3.封閉液(5%小牛血清/PBS溶液)
小牛血清5ml,1*PBS(pH7.4)95ml
4.洗滌液(PBST,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,Tween200.05ml,疊氮鈉0.01g,加雙蒸水至100ml,調(diào)至pH7.4
5.樣本稀釋液(PBS,pH7.4)
NaCl0.8g,KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O0.29g,KCl0.02g,疊氮鈉0.01g,加雙蒸水至100ml,調(diào)至pH7.4
6.酶標(biāo)第2抗體(羊抗兔)稀釋范圍1:5,000-1:100,000
7.底物液(TMB-過(guò)氧化氫尿素溶液)
①底物液A:TMB20mg,無(wú)水乙醇10ml,加雙蒸水至100ml.
②底物液B(0.1mol/L檸檬酸-0.2mol/L磷酸二氫鈉緩沖液,pH5.0-5.4)
Na2HPO41.46g,檸檬酸0.933g,0.75%過(guò)氧化氫尿素0.64ml,加三蒸水至100ml,調(diào)至pH5.0-5.4
③底物A和B按1:1混合即成TMB-過(guò)氧化氫尿素溶液.
8.終止液(2mol/LH2SO4溶液)雙蒸水200ml,濃硫酸34ml,(緩慢滴加并不斷攪拌),加雙蒸水至300ml9.0.9%生理鹽水

操作步驟:
1.包被過(guò)程(注意設(shè)置空白對(duì)照,陰性對(duì)照):
將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當(dāng)濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋或?qū)迤椒旁诘撞坑袧窦啿嫉慕饘贊窈兄?
2.封閉酶標(biāo)反應(yīng)孔:
5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時(shí)將封閉液加滿各反應(yīng)孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結(jié)束后用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.
洗滌方法:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動(dòng),吸干孔內(nèi)液,傾去液體后在吸水紙上拍干
洗滌次數(shù)3次
3.加入待檢測(cè)樣品(建立合適的濃度梯度):
檢測(cè)時(shí)一般采用1:50-1:400的稀釋度,應(yīng)采用較大稀釋體積進(jìn)行,一般保證樣品吸取量>20μl.
將稀釋好的樣品加入酶標(biāo)反應(yīng)孔中,每樣品至少加雙孔,每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.
4.加入酶標(biāo)抗體:
酶標(biāo)抗體:根據(jù)酶結(jié)合物提供商提供的參考工作稀釋度進(jìn)行.37℃,30-60min之間.短于30min往往結(jié)果不穩(wěn)定.每孔加100μl.洗滌同前.
5.加入底物液(現(xiàn)用現(xiàn)配):
*TMB-過(guò)氧化氫尿素溶液,OPD-過(guò)氧化氫底物液系統(tǒng)次之.
底物加入量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分鐘,加入終止液顯色.
6.終止反應(yīng):
每孔加入終止液50μl終止反應(yīng),于20min內(nèi)測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果.
7.結(jié)果判斷:
OPD顯色后采用492nm波長(zhǎng),TMB反應(yīng)產(chǎn)物檢測(cè)需要450nm波長(zhǎng).檢測(cè)時(shí)一定要首行空白孔系統(tǒng)調(diào)零.用測(cè)定標(biāo)本孔的吸收值與一組陰性標(biāo)本測(cè)定孔平均值的比值(P/N)表示,當(dāng)P/N大于2時(shí)作為抗體的效價(jià).(數(shù)值的大小依具體檢測(cè)要求而定.)
MA17457    Helicobacter pylori 54 kDa Ag.    100 μg
MA17458    Helicobacter pylori 54 kDa Ag.    100 μg
MA17459    Helicobacter pylori 58 kDa Ag.    100 μg
MA1746    Rapsyn    100 μg
MA17460    Helicobacter pylori 58 kDa Ag.    100 μg
MA17461    Trichomonas vaginalis p65    100 μg
MA17464    Feline Leukemia Virus p27    100 μg
MA17465    Feline Leukemia Virus gp70    100 μg
MA17466    Feline Leukemia Virus p27    100 μg
MA17467    Canine Parvovirus    100 μg
MA17468    Canine Distemper Virus    100 μg
MA17469    Cryptosporidium parvum Oocysts    100 μg
MA17470    Cryptosporidium parvum Oocysts    100 μg
MA17471    Cryptosporid. parvum Oocysts (FITC)    100 μg
MA17472    Campylobacter jejuni 100 kDa Ag.    100 μg
MA17473    Campylobacter jejuni 100 kDa Ag.    100 μg
MA17474    Campylobacter jejuni 100 kDa Ag.    100 μg
MA17475    Bacillus anthracis protective Ag.    100 μg
MA17476    Bacillus anthracis spore Ag.    100 μg
MA17479    Staphylococcus Enterotoxin B    100 μg
MA17480    Staphylococcus Enterotoxin A    100 μg
MA17481    Staphylococcus Enterotoxin A    100 μg
MA17482    Staphylococcus Enterotoxin B    100 μg
MA17483    Vaccinia Virus, free form    100 μg
MA17484    Vaccinia Virus, free form    100 μg
MA17485    Vaccinia Virus, free form    100 μg
MA17486    Vaccinia Virus, free form    100 μg
MA1750    Prion Protein    200 μg
MA1751    Presenilin 1    200 μg
MA1752    Presenilin 1    200 μg
MA1753    Presenilin 2    200 μg
MA1754    Presenilin 2    200 μg
MA17586    HIV-1 p24    100 ug
MA17587    HIV-1 p55/17    100 ug
MA17588    HIV-1 p17    100 ug
MA17589    HIV-2 gp36    100 ug
MA17590    HIV-1 gp41    100 ug
MA17591    Hepatitis C    100 ug
MA17592    Hepatitis C    100 ug
MA17593    Hepatitis C    100 ug
MA17594    Herpes Simplex Virus    100 ug
MA17595    Herpes Simplex Virus    100 ug
MA17596    Cytomegalovirus IE 72kDa Ag    100 ug
MA17597    Cytomegalovirus pp65    100 ug
MA17598    Cytomegalovirus gB    100 ug
MA17599    Adenovirus    100 ug
MA1760    Nonspecific Cytotoxic Cell    200 μg
MA17600    Adenovirus    100 ug
MA17601    Rotavirus    100 ug
MA17602    TGE    100 ug
MA17603    Hepatitis B Surface Ag.    100 ug
MA17604    Hepatitis B Surface Ag.    100 ug
MA17606    Hepatitis B Core Ag.    100 ug
MA17607    Hepatitis B Core Ag.    100 ug
MA17608    Hepatitis B Core Ag.    100 ug
MA17609    Hepatitis B Core Ag.    100 ug
MA17610    Hepatitis B Core Ag.    100 ug
MA17611    Hepatitis C    100 ug
MA17612    Hepatitis C    100 ug
MA17613    Hepatitis C    100 ug
MA17616    Hepatitis C    100 ug
MA17620    Pierce(R) Anti-Glutathione    Mouse Monoclonal Antibody,    100 ug
MA17621    Pierce(R) Anti-GSK3 beta MouseMonoclonal Antibody, 100 ug    100 ug
MA17622    Fas    100 ug
MA17623    Fas    100 ug
MA17624    Fas    100 ug
MA17625    Fas    100 ug
兔抗狗IgG-HRP
兔抗豚鼠IgG-HRP
兔抗猴IgG-HRP
兔抗HRP-HRP
兔抗Dig-HRP
兔抗親和素-HRP
兔抗-HRP 
兔抗FITC-HRP
牛血清白蛋白 BSA-HRP
人白蛋白-HRP
HRP標(biāo)記親和素
HRP標(biāo)記
HRP標(biāo)記鏈霉親和素
純化抗體
羊抗人IgG(純化)
羊抗人IgA(純化)
羊抗人IgM(純化)
羊抗人C3(純化）
羊抗人白蛋白（純化）
羊抗兔IgG(純化)
羊抗齊一生物供應(yīng)IgG （純化）
羊抗小鼠IgG(純化)
羊抗豬IgG(純化)
羊抗牛gG(純化)
羊抗BSA(純化)
兔抗雞IgG(純化)
兔抗人IgG(純化)
兔抗山羊IgG(純化)
兔抗小鼠IgG(純化)
兔抗齊一生物供應(yīng)IgG(純化)
兔抗豚鼠IgG(純化)
兔抗馬IgG(純化)
兔抗狗IgG(純化)
兔抗猴IgG(純化)
兔抗-HRP(純化）
兔抗親和素（純化）
兔抗（純化）
免疫血清
羊抗人IgG(免疫血清）
羊抗人IgM(免疫血清）
羊抗人IgA(免疫血清）
羊抗人C3(免疫血清）
羊抗人白蛋白(免疫血清）
羊抗(免疫血清）
羊抗人血清(免疫血清）
羊抗小鼠IgG(免疫血清)
羊抗齊一生物供應(yīng)（免疫血清）
羊抗兔IgG(免疫血清)
羊抗牛IgG(免疫血清)
羊抗豬IgG(免疫血清)
羊抗雞IgG（免疫血清）
羊抗馬IgG（免疫血清）
羊抗BSA（免疫血清）
兔抗人IgG（免疫血清）
兔抗人IgA（免疫血清）
兔抗人IgM（免疫血清）
兔抗（免疫血清）
兔抗小鼠IgG（免疫血清）
兔抗齊一生物供應(yīng)IgG（免疫血清）
兔抗山羊IgG（免疫血清）
兔抗狗IgG（免疫血清）
兔抗猴IgG（免疫血清）
兔抗豬IgG（免疫血清）
兔抗馬IgG（免疫血清）
兔抗豚鼠IgG（免疫血清）
兔抗雞IgG （免疫血清）
兔抗 （免疫血清）
兔抗Avidin (卵清親合素) （免疫血清）